fivephoton DnsylD-1說明書

熒光多巴胺| 熒光神經遞質 - 丹磺酰5-C共軛| FIVEPHOTON BIOCHEMICALS | 丹磺酰 - 多巴胺| 部分DNSYLD-1

熒光多巴胺神經遞質 

（用通過5碳間隔臂連接的丹磺酰基標記的多巴胺：Ex / Em：333 / 515nm）。Syn：Dansyl-Dopamine，Part DnsylD-1^TM

Fivephoton Biochemicals的專有產品

圖標圖像：在96孔培養皿的孔上方的多個標記細胞的低放大倍數視圖。

強調

1. Pharmalogical屬性幾乎與天然多巴胺相同。
2. DnsylD-1在納摩爾濃度下選擇性地在攝取和結合測定中操作。 
3. 天然多巴胺化學結構是該熒光兒茶酚胺的主要成分，產生對所有多巴胺受體亞型以及多巴胺轉運蛋白具有高親和力的熒光神經遞質分子。
4. 帶有5碳多聯體多巴胺的小丹參標記產生穩定，明亮的熒光信號，空間位阻可忽略不計。 
5. 丹酰熒光標簽提供大的斯托克斯位移，使自發熒光和非特定背景信號小化：（Ex / Em：313 / 515nm）。
6. DnsylD-1 ^TM的熒光信號 可被多巴胺受體和DAT的標準抑制劑阻斷。
7. 標準抑制劑可用于區分DnsylD-1 ^TM  與多巴胺受體和DAT 的相互作用。
8. 來自DnsylD-1 ^TM的熒光 與酪氨酸羥化酶共定位并鑒定多巴胺能神經元。
9. 為了測定多巴胺受體結合，首先將提供的固體懸浮于DMSO（10-50μl）中。離心機，澄清，并收集DMSO可溶部分，其可被等分并儲存在-20 ^ø C：DnsylD-1 ^TM  懸浮于DMSO時和冷凍于-20 ^Ô C是至少2年的穩定。將DMSO溶解的物質稀釋到測定緩沖液（例如PBS-BSA）中至所需的測定濃度。 通過熒光顯微鏡，熒光板讀數器或流式細胞術檢測DnsylD-1 ^TM。將熒光檢測設備設置為Ex / Em：333/515 nm。

數量¹

可提供批量和定制合成。請咨詢customersupport@fivephoton.com

¹為了估計 您需要的DnsylD-1 ^TM的量，使用多巴胺Kd的10到100倍的測定濃度用于您正在研究的多巴胺受體亞型或轉運蛋白（使用文獻綜述來確定平均報告的Kd值多巴胺受體亞型或轉運蛋白）。然后估計所需您的測定中的總的外部測定緩沖液體積（例如50微升每孔的測定緩沖液在96孔培養皿乘以孔的數目），以計算DnsylD-1的量^TM  整個所需檢測。如需技術支持，請聯系technicalsupport@fivephoton.com或致電：800.462.4507（：858.395.4026）。

產品規格

• 光譜特征和測定波長：Ex：Em：333：515nm
• MW：499.62（質量和QC由MALDI驗證）
• 外觀：凍干的灰白色固體
• 純度：≥95％（HPLC;查看批次純度的COA）
• 溶解度：DMSO
• 分析性QC測試：MALDI MS和HPLC
• 使用10X Kd的未標記多巴胺對各自的多巴胺受體亞型或轉運蛋白
• 存儲（凍干粉）：4 ^ø C，暗，變干。存儲在DMSO中溶解時：-20 ^Ó C，等分試樣。
• 運輸：環境溫度。

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熒光多巴胺神經遞質配體（丹磺酰 - 多巴胺），概述

這種熒光標記的多巴胺兒茶酚胺神經遞質類似物（產品名稱：DnsylD-1 ^TM），丹磺酰基通過5-碳間隔臂與多巴胺連接，提供了*的藥理學工具。DnsylD-1 ^TM 是一種穩定的受體選擇性和高親和力藥理配體，可通過熒光顯微鏡和FLIPR裝置檢測。與近報道的合成熒光神經遞質類似物不同，DnsylD-1 ^TM  含有與5-碳多接頭連接的完整天然多巴胺結構部分至小熒光標記丹酰。這種結構修飾使空間位阻小化，使DnsylD-1 ^TM成為可能 納摩爾濃度的多巴胺配體結合和轉運蛋白攝取試驗的有效試劑。 

丹毒熒光標簽在激發和發射大值之間提供大的斯托克斯位移（Ex：Em，313：515 nm），與其他熒光標簽如FITC不同，有助于以小的自發熒光進行高信噪比檢測。丹磺酰部分還改變分子間接觸的光譜特征，促進配體 - 受體相互作用的生物物理表征。DnsylD-1 ^TM  是放射性配體的合適替代物。

熒光多巴胺配體 - 神經遞質（DnsylD-1 ^TM）的應用

DnsylD-1 ^TM 具有以下適用性，因為丹酰熒光標記的分子尺寸小，多巴胺結構和熒光標記之間的長間隔臂，水溶液中的穩定性和周圍細胞或組織培養基的低自發熒光。

1. 藥理學應用作為放射性配體的替代品。
2. 多巴胺能神經元檢測：生物標志物檢測。
3. 多巴胺攝取分析。
4. 體內和體外多巴胺受體表達的組織化學成像和定量。
5. 多巴胺代謝和營業額分析。
6. 分析與改變的多巴胺合成，多巴胺受體表達或多巴胺攝取相關的疾病狀況：人類疾病研究在以下方面的適用性：a）帕金森氏病。b）心理障礙，包括ADHD，精神分裂癥和藥物濫用。c）心血管，腎臟和免疫功能的生理調節。

圖像：   DnsylD-1 ^TM （丹酰基 - 多巴胺）與神經母細胞瘤細胞結合，并通過低倍熒光顯微鏡在96孔板的孔中觀察。顯示多個單元格。  

小組。內源性表達多巴胺受體的大鼠神經母細胞瘤細胞在96孔培養皿的孔中生長，與DnsylD-1 ^TM孵育30分鐘， 濃度為多巴胺對D2多巴胺受體的Kd濃度的10倍。用熒光顯微鏡在孔頂部以50X放大率拍攝圖像。

底部面板。在暴露DnsylD-1 ^TM之前，將LD X Xd濃度的未標記多巴胺預曝光15分鐘，以DX 的Kd濃度為10倍，如上圖所示。未標記的多巴胺的預暴露有效地阻斷DnsylD-1 ^TM的結合， 表現出高親和力和選擇性。

產品參考

May S，Andreasson-Ochsner M，Fu Z，Low YX，Tan D，de Hoog HP，Ritz S，Nallani M，Sinner EK。2013.體外表達的GPCR插入聚合物膜用于配體結合研究。Angew。化學。詮釋。Ed，52,749-753