MRC-Holland P034說(shuō)明書(shū)

SALSA MLPA P034 DMD mix 1 probemix CE;CO;嘛;IL

應(yīng)用： Duchenne肌營(yíng)養(yǎng)不良癥（DMD）; Becker肌營(yíng)養(yǎng)不良癥（BMD）
區(qū)域： DMD Xp21.1-p21.2

說(shuō)明
用途：該SALSA ^® MLPA ^® probemixes P034 DMD-1和P035 DMD-2是一種體外診斷（IVD）¹或研究用途僅（RUO）用于檢測(cè)在人DMD基因的外顯子缺失或重復(fù)的測(cè)定Duchenne肌營(yíng)養(yǎng)不良癥和/或Becker肌營(yíng)養(yǎng)不良癥的原因及其載體篩選。該測(cè)定法可以與來(lái)自外周血，（未）培養(yǎng)的羊水的人DNA一起使用，所述羊水在妊娠第16周或之后獲得并且沒(méi)有血液污染，（未）培養(yǎng)的絨毛膜絨毛沒(méi)有母體污染或胎兒血液。

在大多數(shù)患者中，DMD基因中的大多數(shù)缺陷是拷貝數(shù)變異（CNV），但是可能發(fā)生MLPA不能檢測(cè)到的點(diǎn)突變。因此，建議將這些SALSA MLPA探針混合物與序列分析結(jié)合使用。僅由單個(gè)探測(cè)檢測(cè)到的拷貝數(shù)變化總是需要通過(guò)另一種方法進(jìn)行驗(yàn)證。這些探針混合物不打算用作臨床決策的獨(dú)立測(cè)定。該測(cè)試的結(jié)果應(yīng)由臨床分子遺傳學(xué)家或同等學(xué)科解釋。

¹請(qǐng)注意，此探針混合物用于本產(chǎn)品說(shuō)明末尾的國(guó)家/地區(qū)的體外診斷用途（IVD）。在所有其他國(guó)家/地區(qū)，該產(chǎn)品僅供研究使用（RUO）。

臨床背景：DMD基因中的種系缺陷是Duchenne肌營(yíng)養(yǎng)不良癥（DMD）和Becker肌營(yíng)養(yǎng)不良癥（BMD）的常見(jiàn)原因。由于DMD和BMD都以X連鎖隱性方式遺傳，因此幾乎僅在男性中發(fā)生。DMD通常在兒童期早期發(fā)病，具有延遲的里程碑，其中包括獨(dú)立坐著和站立的延遲。近端無(wú)力導(dǎo)致蹣跚的步態(tài)和攀爬困難。DMD是快速進(jìn)展的，受影響的兒童在13歲時(shí)受輪椅依賴(lài)。呼吸系統(tǒng)并發(fā)癥和心肌病發(fā)生在18歲以后的DMD患者中，并且少數(shù)存活超過(guò)生命的第三個(gè)十年。相比之下，BMD的進(jìn)展速度較慢，患者平均存活至40多歲。

DMD基因中完整外顯子的缺失和重復(fù)是疾病的常見(jiàn)原因，并且通常通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)序列分析遺漏。大多數(shù)這些缺失和重復(fù)可以通過(guò)MLPA技術(shù)檢測(cè)，因此MLPA補(bǔ)充DMD基因的序列分析。DMD / BMD患者DMD基因缺失/重復(fù)的頻率估計(jì)為缺失的60-70％和重復(fù)的5-10％。關(guān)于Duchenne / Becker肌營(yíng)養(yǎng)不良癥的分子診斷的實(shí)踐指南已由Abbs S.等人（2010）發(fā)表。

P034-B2和P035-B1 DMD探針內(nèi)容：P034和P035探針混合物在Xp21.2染色體上包含針對(duì)DMD基因的每個(gè)外顯子（79個(gè)外顯子）的一個(gè)探針。此外，在P035-B1中存在一個(gè)探針，用于在DMD的轉(zhuǎn)錄物變體Dp427c中發(fā)現(xiàn)的替代外顯子1。因此，進(jìn)行兩次MLPA反應(yīng)足以研究所有外顯子的拷貝數(shù)。

P034-B2探針混合物含有49個(gè)MLPA探針，其擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度在130和500nt之間，包括9個(gè)參照探針。P035-B1探針混合物含有48種MLPA探針，其擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度為130至500nt，其中8種為參照探針。

這些探針混合物中的每一個(gè)含有9個(gè)質(zhì)量控制片段，產(chǎn)生64和105nt之間的擴(kuò)增產(chǎn)物：四個(gè)DNA量片段（Q片段），三個(gè)DNA變性片段（D片段），一個(gè)染色體X和一個(gè)染色體Y特異性片段（表格1）。只有使用少于100 ng的樣品DNA時(shí)才能看到Q片段。88或96nt片段的低信號(hào)表明DNA變性不*。有關(guān)如何解釋對(duì)這些控制片段的觀察的更多信息可以在MLPA通用協(xié)議中找到。

相關(guān)產(chǎn)品

SALSA MLPA P048 LMNA / MYOT / ZMPSTE24探針：Laminopathies，含有LMNA，MYOT和CAV3基因的探針。

SALSA MLPA P116 SGC探針：肢帶肌營(yíng)養(yǎng)不良癥（LGMD），含有SGCA，SGCB，SGCD，SGCG和FKRP基因的探針。

SALSA MLPA P176 CAPN3探針：肢帶肌營(yíng)養(yǎng)不良癥（LGMD），含有CAPN3基因的探針。

SALSA MLPA P268 DYSF探針：肢帶肌營(yíng)養(yǎng)不良癥（LGMD），含有DYSF基因的探針。