proteinslides Maleimide surfaces說明書

Maleimide surfaces

馬來酰亞胺表面

應用說明： 

馬來酰亞胺基團與巰基基團之間的共價連接是生物綴合化學中選擇性，容易，方便的反應之一。現在，我們已經在ZeroBkg®表面上提供了這種喜愛的反應。

研究科學家，臨床實驗室和診斷試劑盒制造商的共同目標是，開發一種提供宜生物活性而不產生生物分子損失，移位或表面遷移的固相環境。一種可能的方法是在不使用任何特殊標簽或化學修飾的情況下，輕松且共價固定蛋白質分子。這可以通過化學反應性基團馬來酰亞胺朝蛋白質分子表面上可用的巰基（–SH）基團方便地實現。我們開發了基于零背景PEG涂層的馬來酰亞胺表面，如圖1所示。馬來酰亞胺衍生化的表面與二硫鍵基團共價結合，該硫基基團在二硫鍵還原后或通過用特殊試劑引入SH基團對伯胺進行化學修飾后可用于生物分子中。PEG的功能性確保了特定分子與表面的結合僅通過在測定過程中與固定的蛋白質分子的特異性相互作用來解決，并且解決了常見的背景問題。

圖1.零背景馬來酰亞胺表面由反應性雙鍵組成，束縛在高密度PEG涂層上。蛋白質分子通過表面–SH基團連接，但被PEG涂層排斥。多余的-SH基團可通過簡單的洗滌步驟輕松停用。相同的固定化反應適用于肽，抗體和寡核苷酸。	圖2.在馬來酰亞胺-PEG /載玻片上制備的染料偶聯的寡核苷酸（-SH）和抗體微陣列（手動點樣）的熒光圖像。每個斑點的直徑約為500 um。

為了證明性能，我們在圖2中顯示了在Mal / PEG /載玻片上制備的巰基綴合的寡核苷酸微陣列（上圖）和抗體微陣列（下圖）。簡而言之，將納升的染料結合的寡核苷酸（30聚體）或含有10％甘油的抗體溶液的液滴沉積在載玻片上，并孵育30分鐘。在室溫下，用鈍化緩沖液去除殘留區域中的SH-基團30分鐘。通過與cy3偶聯的二抗孵育來檢測表面上的固定抗體。載玻片在激光掃描儀上成像。重要的結果是由于PEG涂層而導致的本底極低。Mal / PEG涂層的載玻片是含有游離–SH基團的生物分子的理想選擇。二硫鍵結合蛋白質中的兩個半胱氨酸殘基非常穩定，

這些涂層可在標準顯微鏡載玻片，蓋玻片，硅片上使用。我們還為特定的客戶樣品提供客戶涂層服務。我們的客戶已成功地將Mal / PEG表面應用于各種應用，包括蛋白質傳感器，蛋白質微陣列，單分子光譜，生物原子力顯微鏡和其他生物物理研究。