PAP（KlenTaq-S 測序酶）說明書

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產品詳情

產品詳情

KlenTaq-S 測序酶是Taq DNA 聚合酶的改造版，為 Taq DNA 聚合酶的大片段，并做了基因突變。本酶具有 5’→3’聚合酶活性，無5’→3’外切酶活性和 3’→5’外切酶活性。相比普通Taq DNA 聚合酶，KlenTaq-S 測序酶具有很強的 ddNTP 的滲入能力，因此其適用于終止法 DNA 測序或焦磷酸解反應 SNP 分析。

本公司 KlenTaq-S 測序酶是重組表達，并經多步純化制備的重組蛋白。

活性定義

活性單位指在 72℃下， 1×AM PCR Buffer 1，30 min 內將 10 nmole dNTP 摻入酸不溶性物質所需的酶量。

特點

1.尤其適合 ddNTP 等修飾核苷酸的摻入反應

2.相比全長 Taq DNA 聚合酶，本酶比活性有所降低

適用范圍

ddNTP 終止法DNA 測序（一代測序）

焦磷酸解反應延伸法 SNP 分析

質量控制

經過嚴格的質控檢測，確保該產品具有最高的活性和純度。

酶貯存緩沖液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5%Tween20, and 50% glycerol.

應用舉例

以下反應舉例為 50 μl 標準 PCR 體系，僅供參考。實際 PCR 條件應根據模板、引物、目的片段大小加以優化，確定最佳反應條件。

1） 按下表配制反應體系

*模板DNA用量參數(50 μl反應體系):

人基因組DNA100-1000 ng ; 微生物基因組DNA 10-100ng；PCR產物 1 ng-10 ng； Plasmid DNA 5-30 ng ; cDNA from RT reaction 1-5 μl 。

2） 按如下條件進行反應，

3） 瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR 產物，或按實驗目的進行后續操作。

注意事項

1.PCR 條件和野生型 Taq DNA 聚合酶類似，對特定 DNA 的測序反應可能需要優化。

2.本酶擴增能力較野生型 Taq DNA 聚合酶有所降低，PCR 產量有所降低，不建議用于常規 PCR。

3.不可用于 Taqman 探針法 q-PCR。

濃度

5U/uL

運輸與保存

-20℃可保存 2 年，避免反復凍融