
產品描述
英文名稱:Anti-TSACC antibody
中文名稱:抗TSACC抗體
貨號:STJ194378-200ug
規格:200 μg
本產品為 St John's Laboratory研發并生產的高特異性多克隆抗體。該抗體靶向人類 TSACC 蛋白的第57至107位氨基酸區域。TSACC 是一種在睪丸組織中高度表達、同時參與細胞凋亡調控的蛋白質,在生殖生物學、腫瘤發生及細胞信號轉導研究中具有重要價值。
本抗體采用兔源免疫系統制備,通過親和純化工藝獲得,確保高純度與高特異性。適用于多種實驗技術平臺,包括但不限于 Western Blot(WB)、免疫沉淀(IP)、免疫熒光(IF)、免疫組化(IHC)等。產品以凍干粉或液體形式提供(具體形式依批次而定)。

產品特點
1. Anti-TSACC 抗體(57-107 aa)具備多項顯著優勢,使其成為研究 TSACC 蛋白功能的理想工具。首先,該抗體針對 TSACC 蛋白 N 端保守結構域(57-107 aa)設計,該區域在進化上高度保守,且遠離已知的翻譯后修飾位點,從而避免因磷酸化、乙酰化等修飾導致的識別偏差,確保抗體在不同生理或病理狀態下均能穩定結合目標抗原。
2. 本抗體采用高親和力兔多克隆體系,經過多輪抗原免疫與血清篩選,最終通過抗原親和層析純化,獲得高特異性與靈敏度。在 Western Blot 實驗中,可清晰識別約 35 kDa 的 TSACC 蛋白條帶,背景信號極低;在免疫熒光染色中,能精準定位 TSACC 在細胞質或特定亞細胞器中的分布,尤其適用于睪丸組織切片或生殖細胞系的研究。
3. 該抗體經過交叉反應性驗證,確認對人源 TSACC 具有高度特異性,對小鼠、大鼠同源蛋白亦有良好識別能力(需參考具體批次數據),但對其他卷曲螺旋結構蛋白無明顯交叉反應,有效避免假陽性結果。
4. 本產品提供靈活的包裝規格(200 μg),適合中長期項目使用,且濃度適中,便于用戶進行梯度稀釋優化實驗條件。產品附帶詳細的技術支持文檔,并可通過 St John's Laboratory 渠道獲取批次特異性驗證數據,極大提升實驗可重復性與數據可信度。
儲存條件
為確保 Anti-TSACC 抗體(57-107 aa)的穩定性與活性,請嚴格按照以下儲存條件操作:
1. 未開封產品應于 -20°C 長期保存,避免反復凍融。若產品以液體形式提供,建議分裝成單次使用量(如 10–20 μL/管),并于 -20°C 凍存。每次使用前,將所需分裝管置于冰上緩慢解凍,使用后立即放回 -20°C。嚴禁在 4°C 長期存放液體抗體超過一周,以免蛋白降解或聚集。
2. 若產品為凍干粉形式,請在收到后立即置于 -20°C 干燥環境中保存。復溶時,建議使用無菌 PBS(pH 7.4)或廠家推薦緩沖液,輕輕混勻至溶解(避免劇烈渦旋),復溶后抗體濃度通常為 1 mg/mL。復溶后的抗體可短期(≤1 周)存放于 4°C,長期仍需分裝凍存于 -20°C。
3. 所有操作過程中應避免抗體接觸強酸、強堿、有機溶劑或高濃度去垢劑(如 SDS >0.1%),以免破壞抗體構象。NaN?作為防腐劑雖可抑制微生物生長,但對辣根過氧化物酶(HRP)有抑制作用,因此用于 HRP 標記二抗系統時,建議在使用前通過透析或脫鹽柱去除 NaN?,或選擇不含防腐劑的批次。
工作原理
1. Anti-TSACC 抗體(57-107 aa)的工作原理基于抗原-抗體的高度特異性結合機制。TSACC 蛋白是一種含有卷曲螺旋結構域的細胞內蛋白,主要在睪丸生精細胞中表達,并在某些癌細胞中異常上調,參與調控線粒體介導的細胞凋亡通路。
2. 在 Western Blot 應用中,樣品經 SDS-PAGE 分離后轉膜,抗體與膜上固定化的 TSACC 蛋白結合,再通過酶標或熒光標記的二抗進行信號放大與檢測,從而實現對 TSACC 表達水平的定量或半定量分析。
3. 在免疫沉淀(IP)實驗中,該抗體可與 Protein A/G 磁珠或瓊脂糖珠偶聯,從細胞裂解液中特異性富集 TSACC 蛋白及其相互作用伙伴,用于后續質譜分析或共免疫沉淀驗證蛋白互作網絡。
4. 在免疫熒光(IF)或免疫組化(IHC)中,抗體穿透固定后的細胞或組織切片,與內源性 TSACC 結合,通過熒光或顯色二抗可視化其亞細胞定位。研究表明,TSACC 主要定位于細胞質,但在凋亡早期可轉位至線粒體外膜,本抗體可有效捕捉這一動態過程,為研究細胞死亡機制提供關鍵工具。
解決實驗中的哪些問題
Anti-TSACC 抗體(57-107 aa)在多個研究場景中可有效解決關鍵實驗難題:
1. TSACC 蛋白表達檢測困難:由于 TSACC 在大多數組織中表達極低,僅在睪丸或特定腫瘤中高表達,常規抗體易出現信號弱或背景高問題。
2. 凋亡通路機制研究受限:TSACC 被證實可與 BAX、BCL2 等凋亡調控蛋白相互作用,但缺乏可靠工具阻礙機制解析。
3. 亞細胞定位不明確:部分文獻報道 TSACC 存在于細胞核或線粒體,存在爭議。本抗體經 IF 驗證,可清晰顯示其在正常與凋亡細胞中的定位差異,幫助厘清其功能場所。
4. 種屬交叉反應不確定:許多商用抗體僅驗證人源,限制動物模型應用。本產品經序列比對與實驗驗證,對小鼠、大鼠 TSACC 同源蛋白具有良好識別能力(同源性 >85%),適用于轉基因或敲除小鼠模型研究。
5. 批次間差異導致數據不可重復:St John's Laboratory 實施嚴格的 QC 流程,每批抗體均提供驗證數據,確保實驗可重復性,避免因抗體質量問題浪費寶貴樣本與時間。
6. 低豐度蛋白檢測靈敏度不足:在 WB 中,即使 TSACC 表達量極低(<1 ng),本抗體仍可產生可檢測信號,配合 ECL 超敏底物,顯著提升檢測下限。
使用方法
· Western Blot(WB)
1. 樣品制備:使用 RIPA 裂解液提取總蛋白,測定濃度(BCA 法),加入上樣緩沖液煮沸 5 分鐘。
2. 電泳與轉膜:按常規 SDS-PAGE 分離蛋白,濕轉或半干轉至 PVDF 膜。
3. 封閉:5% 脫脂奶粉/TBST 室溫封閉 1 小時。
4. 一抗孵育:用 TBST 稀釋抗體,4°C 孵育過夜或室溫 2 小時。
5. 洗滌:TBST 洗 3×10 分鐘。
6. 二抗孵育:HRP 標記抗兔 IgG,室溫 1 小時。
7. 顯影:ECL 化學發光,X 光片或成像系統檢測。
· 免疫熒光(IF)
1. 細胞固定:4% 多聚甲醛室溫固定 15 分鐘,PBS 洗 3 次。
2. 透化:0.1% Triton X-100/PBS 室溫 10 分鐘(如需檢測胞內抗原)。
3. 封閉:5% BSA/PBS 室溫 1 小時。
4. 一抗孵育:抗體稀釋于 1% BSA/PBS(1:200–1:500),4°C 過夜。
5. 洗滌:PBS 洗 3×5 分鐘。
6. 二抗孵育:熒光標記抗兔 IgG(如 Alexa Fluor 488,1:1000),避光室溫 1 小時。
7. 核染與封片:DAPI 染核,抗熒光淬滅封片劑封片,共聚焦顯微鏡觀察。
· 免疫沉淀(IP)
1. 預澄清:細胞裂解液與 Protein A/G 珠 4°C 旋轉 1 小時,離心取上清。
2. 抗體結合:加入 2–5 μg 抗體,4°C 旋轉 2 小時。
3. 加珠:加入 20 μL Protein A/G 磁珠,4°C 旋轉過夜。
4. 洗滌:冷裂解液洗 4–5 次。
5. 洗脫:SDS 上樣緩沖液 95°C 5 分鐘,用于 WB 或質譜。
常見問題與解決方案
問題一:Western Blot 無信號或信號極弱
可能原因包括抗體稀釋度過高、樣品中 TSACC 表達量過低、轉膜效率差或抗原表位被遮蔽。建議首先確認樣品來源是否為 TSACC 高表達組織;其次嘗試降低稀釋比;檢查轉膜;若使用甲醛固定的樣品,需進行抗原修復。
問題二:非特異性條帶或高背景
常見于封閉不充分、一抗濃度過高或洗滌不干凈。建議延長封閉時間至 2 小時,使用 5% BSA 替代奶粉;降低抗體濃度;增加 TBST 洗滌次數與時間;確保二抗無非特異結合(設置無一抗對照)。
問題三:免疫熒光染色呈彌漫性或核定位錯誤
可能因透化過度導致蛋白泄漏,或固定不充分。建議優化透化時間,使用新鮮配制的多聚甲醛;設置同型對照排除非特異結合;確認 TSACC 文獻報道的定位。
問題四:IHC 染色陰性
組織中 TSACC 表達本身較低,或抗原修復不足。建議使用陽性對照組織;嘗試不同抗原修復方法;延長一抗孵育時間至 48 小時。
問題五:IP 實驗未富集到目標蛋白
可能因抗體無法識別天然構象 TSACC,或裂解條件過于劇烈破壞蛋白復合物。建議使用溫和裂解液;驗證抗體是否適用于 IP;增加抗體用量至 10 μg;設置 Input 對照確認表達。
問題六:抗體沉淀或渾濁
可能因凍融不當或污染。建議離心(12,000 rpm, 5 分鐘)取上清使用;若持續渾濁,聯系技術支持。
免責聲明
1. 本文內容基于品牌公開資料及行業常規信息整理,僅個人觀點,具體以品牌信息文檔為準。
2. 本產品由 St John's Laboratory 研發生產,僅供科學研究使用,不得用于任何臨床診斷、治療、預防疾病或商業用途。
3. St John's Laboratory 已盡努力確保產品信息的準確性與可靠性,包括序列信息、應用驗證及性能數據。
4. 本產品受知識產權保護,未經書面許可,不得用于反向工程、轉售或制造仿制品。如對產品有任何疑問,請聯系技術支持郵箱或訪問獲取資料。
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STJ193829-20ug | Anti-TRIM50 Antibody | 20ug | stjohnslabs |
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STJ11107673-20ul | Anti-Phospho-Rptor-S791 antibody | 20ul | stjohnslabs |
STJ116312-20uL | Anti-NMU antibody (35-174) (STJ116312) | 20uL | stjohnslabs |
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